АДАПТАЦІЯ МЕТОДІВ ЕЛЕКТРОННОЇ СКАНУЮЧОЇ МІКРОСКОПІЇ ДЛЯ ДОСЛІДЖЕННЯ ПИЛКОВИХ ЗЕРЕН

Автор(и)

  • Леонора Адамчук Національний університет біоресурсів і природокористування України, м. Київ, Україна
  • Владислав Сухенко Національний університет біоресурсів і природокористування України, м. Київ, Україна
  • Микола Скорик Інститут металофізики ім. Г. В. Курдюмова Національної академії наук України м. Київ, Україна

DOI:

https://doi.org/10.31073/foodresources2020-14-02

Ключові слова:

пилкове зерно, метод, скануюча електронна мікроскопія

Анотація

Єдиним дієвим методом ідентифікації продуктів бджільництва за ботанічним та географічним походженням є дослідження видової приналежності наявних у їх складі пилкових зерен. Ідентифікація пилкових зерен за морфологічними ознаками та їх відсотковим співвідношенням у продукті дозволяє встановити ботанічний сорт меду (акацієвий, липовий). Для вивчення особливостей морфологічної будови пилкових зерен використовують методики світлової та електронної мікроскопії. Відсутність детальної ідентифікації пилкових зерен багатьох видів ентомофільних рослин України зумовлює актуальність дослідження їх морфології. Метою роботи було випробувати та адаптувати відомі методики електронної мікроскопії для ідентифікації пилкових зерен на доступному в Україні обладнанні. Матеріалом слугували гербарні зразки різних видів ентомофільних рослин зібраних в умовах Київської обл. Ідентифікацію рослин та підготовку проб проводили на базі лабораторій кафедри стандартизації та сертифікації с.-г. продукції НУБіП України. Випробування методик проводили на базі лабораторії електронної мікроскопії ТОВ «НаноМедТех» використовуючи електронний скануючий мікроскоп Tescan Mira 3 LMU, систему прецизійного травлення та покриття Gatan Pecs 682. Встановили, що використання адаптованої до наявного обладнання методики електронної мікроскопії за підготування зразків на основі 2,2-диметоксипропану, дозволить досліджувати морфологію пилкових зерен ентомофільних рослин України, що у подальшому дасть можливість ідентифікувати їх у продукції бджільництва. Зображення, що були отримані за методикою підготування зразка з використанням фіксації на основі глутарового альдегіду, демонстрували відповідність форми але деформовану поверхню зерна. За підготування зразка за методикою з використанням 2,2-диметоксипропану, зображення свідчать про збереження форми і структури поверхні пилкового зерна. Використання адаптованої методики підготовки зразків на основі попередньої обробки 2,2-диметоксипропаном, дегідратації та сушки в критичній точці CO2, з подальшим дослідженнями методами скануючої електронної мікроскопії дає можливість ідентифікувати пилкові зерна медоносних рослин. У подальшому планується поповнювати отриманими знімками міжнародну онлайн дата-базу PalDat, що дасть можливість встановлювати ботанічне та географічне походження продукції бджільництва з України, яка реалізується за кордон.

Завантаження

Дані завантаження ще не доступні.

Посилання

https://doi.org/10.31073/foodresources2020-14-02

Von Der Ohe W., Oddo L. P., Piana M. L., Morlot M., Martin, P. (2004). Harmonized methods of melissopalynology. Apidologie, 35(Suppl. 1), S. 18–25.

Total Quality Assurance. Intertek Group plc. URL: http://www.intertek.com.

PalDat – Palynological Database. Division of Structural and Functional Botany (www.botanik.univie.ac.at/sfb), AutPal, the “Society for the Promotion of Palynological Research in Austria” (www.autpal.at). URL: https://www.paldat.org.

Matyashuk R., Mazura M., Yurchuk, M. (2019). Reactions of pollen of plants from genus Lysimachia L. on Diferrent Enviromental Conditions. Agrobiodiversity for improving nutrition, health and life quality, P. 81–92.

Zhygalova S. L. (2009) Palinomorfolohichni osoblyvosti pylkovykh zeren vydiv rodu [The pollen grains characteristics of Juglans L. species.]. Chornomorskyi botanichnyi zhurnal [Chornomors’k Botanical Journal], Vol. 5, № 2. Р. 199–206. [In Ukrainian].

Tsymbaliuk Z. M., Mosiakin S. L. (2017). Palinomorfolohichni osoblyvosti predstavnykiv tryby Rhinantheae (Orobanchaceae) u svitli molekuliarno-filohenetychnykh danykh [Palynomorphological features of representatives of the Rhinantheae (Orobanchaceae) tribe in the light of molecular and phylogenetic data]. Ukrainskyi botanichnyi zhurnal [Ukrainian Botanical Journal], 74 (4), P. 310–325. https://doi.org/10.15407/ukrbotj76.01.009 [In Ukrainian].

Sokol O., Dzhurenko N., Gournenko I. Ultrastrukturni osoblyvosti pylkovykh zeren vydiv rodu Arctium L. (Asteraceae bercht. & j.Presl.). [The ultrastructural features of pollens grains in species of the genus Arctium L. (Asteraceae bercht. & J.Presl)]. Visnyk Lvivskoho universytetu. Seriia: biolohichna [Visnyk of the Lviv University. Series: Biology]. 2019. Is. 80. P. 67–72. DOI: http://dx.doi.org/10.30970/vlubs.2019.80.08 [In Ukrainian].

Jia P. F., Li H. J., Yang W. C. (2017). Analysis of Peroxisome Biogenesis in Pollen by Confocal Microscopy and Transmission Electron Microscopy. In Plant Germline Development, P. 173–180.

Shen W., Ma L., Zhang X., Li X., Zhao,Y., Jing Y., Feng Y., Tan X., Sun F., Lin, J. (2019). Three-dimensional reconstruction of Picea wilsonii Mast. pollen grains using automated electron microscopy. Science China Life Sciences, Р. 1–9. February 2020 Vol.63 No.2: 171–179. DOI: https://doi.org/10.1007/s11427-019-9820-4.

Brindza J., Motyleva S., Ostrovský R., Grygorieva O., Adamchuk L., Horčinova Sedlačková V., Juríková T., Fatrcová-Šramková K., Shwaryová M., Brovaskyi V., Velychko S., Tkachenko O. (2018). Peľ a včelie peľové obnôžky z niektorých druhov rastlín [Pollen and bee pollen same plant species]. Nitra : SPU v Nitre. 147 p. ISBN 978-80-552-1862-5 [In Slovakian].

Ulf Brunk V., Collins P., Arro E. (1981). The fixation, dehydration, drying and coating of cultured cells for SEM. Journal of Microscopy, Vol. 123, Р. 121–131.

Halbritter H. (1998). Preparing living pollen material for scanning electron microscopy using 2, 2-dimethoxypropane (DMP) and critical-point drying. Biotechnic & Histochemistry, 73(3), Р. 137–143.

##submission.downloads##

Опубліковано

2020-06-25

Як цитувати

Адамчук, Л., Сухенко, В., & Скорик, М. (2020). АДАПТАЦІЯ МЕТОДІВ ЕЛЕКТРОННОЇ СКАНУЮЧОЇ МІКРОСКОПІЇ ДЛЯ ДОСЛІДЖЕННЯ ПИЛКОВИХ ЗЕРЕН. ПРОДОВОЛЬЧІ РЕСУРСИ, 8(14), 20–28. https://doi.org/10.31073/foodresources2020-14-02

Номер

Розділ

Технічні науки